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目的
研究高温对局灶性脑缺血组织蛋白酶L(CTSL)表达的影响,探讨高温加重缺血性脑损伤的机制。
方法100只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组(n=20)、常温组(n=40)和高温组(n=40)。常温组和高温组参照Longa等方法制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAo)缺血1 h再灌注模型。高温组保持肛温39.0 ℃(瑞沃德恒温加热装置),共3 h。假手术组和常温缺血组保持肛温37.5 ℃。假手术组只分离血管,不结扎,不插线。测定再灌注24 h后3组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积及脑含水量。Western blotting和免疫组化法检测再灌注3 h、6 h和24 h后大鼠缺血脑组织CTSL表达。
结果(1)高温组大鼠再灌注24 h后神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比及手术侧脑含水量均高于常温组大鼠再灌注24 h后结果(3.37±0.48 vs. 2.20±0.42、59.08%±0.98% vs. 37.96%±0.16%、84.82%±1.79% vs. 82.18%±0.45%),差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)Western blotting检测结果显示,常温组大鼠各时间点CTSL表达无明显变化;而高温组大鼠CTSL表达于再灌注后3 h即开始增加,24 h仍未恢复正常,各时间点均高于常温组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)免疫组化法显示神经元与神经胶质细胞均可表达CTSL,以神经胶质细胞为主。再灌注后3 h、6 h、24 h,高温组大鼠CTSL阳性表达神经元中CTSL平均密度值均明显高于常温组及假手术组大鼠,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论脑缺血再灌注时,高温可能通过上调CTSL的表达加重缺血性脑损伤。