【摘 要】
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我们通过增强胶质瘤中连接蛋白43(CX43)的表达,恢复细胞间隙连接通讯(GJIC)功能,观察其对胶质瘤中水通道蛋白4(AQP4)表达的影响,探讨胶质瘤性脑水肿的发病机制.一、材料与方法1.材料:鼠胶质瘤细胞株C6购自上海肿瘤研究所,CX43表达质粒由天津市神经病学研究所馈赠;雄性SD大鼠购自中国军事医学科学院动物中心,饲养于天津医科大学实验动物中心.2.细胞培养与质粒转染:C6胶质瘤细胞在含10
【机 构】
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300450天津市第五中心医院神经外科,300450天津市第五中心医院神经外科,天津医科大学总医院神经病理科,杜克大学生物医学工程系,300450天津市第五中心医院神经外科,300450天津市第五中心
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我们通过增强胶质瘤中连接蛋白43(CX43)的表达,恢复细胞间隙连接通讯(GJIC)功能,观察其对胶质瘤中水通道蛋白4(AQP4)表达的影响,探讨胶质瘤性脑水肿的发病机制.一、材料与方法1.材料:鼠胶质瘤细胞株C6购自上海肿瘤研究所,CX43表达质粒由天津市神经病学研究所馈赠;雄性SD大鼠购自中国军事医学科学院动物中心,饲养于天津医科大学实验动物中心.2.细胞培养与质粒转染:C6胶质瘤细胞在含10％胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中培养,以LipoVecTM进行CX43表达质粒的基因转染.3.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测CX43的表达:提取细胞总RNA,逆转录后行PCR检测.反应条件如下:94℃变性30 s,56℃退火30 min,72℃延伸1 min,32个循环后72℃延伸10 min。
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