【摘 要】
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目的 观察青蒿琥酯对骨髓瘤细胞SP2/0的增殖抑制及促凋亡作用,并对其机制进行初步探讨.方法 利用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度青蒿琥酯对SP2/O细胞作用24、48和72
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目的 观察青蒿琥酯对骨髓瘤细胞SP2/0的增殖抑制及促凋亡作用,并对其机制进行初步探讨.方法 利用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度青蒿琥酯对SP2/O细胞作用24、48和72 h后的增殖抑制作用,并观察其对SP2/0小鼠移植瘤的抑瘤效应.常规Giemsa染色、DAPI荧光染色以及透射电镜下观察细胞凋亡的形态学变化,琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA梯带,利用Annexin V/PI双染和流式细胞术检测青蒿琥酯作用后24、48 h SP2/0细胞的凋亡率和细胞周期.Western blot检测核因子kB(NF-kB)p65及其抑制蛋白(IKB)α的水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测NF-KB p65的转录活性.结果 2μg/ml青蒿琥酯作用24 h,对SP2/0细胞增殖抑制率即达33.0%;40μg/ml青蒿琥酯作用72 h,细胞增殖抑制率达91.9%,呈现出明显的时间、剂量依赖性.50、100和200 mg·kg-1·d-1的青蒿琥酯对SP2/0小鼠移植瘤的抑瘤率分别为17.8%、36.5%和48.O%.2 wg/ml青蒿琥酯作用24 h,G0/1期细胞数目增多(50.6%±0.8%),凋亡率为7.7%;40μg/ml青蒿琥酯作用48 h,G0/G1期细胞达75.3%±7.0%,凋亡率为78.7%,呈时间、剂量依赖性.胞核中NF-kB p65蛋白减少,胞浆中IKBα蛋白的表达增加,NF-kB p65的转录活性降低.结论 青蒿琥酯对骨髓瘤细胞SP2/0有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用,是一种潜在的抗骨髓瘤药物,其作用机制与抑制NF-kB p65的转录活性有关.
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