【摘 要】
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根据已知的乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)序列设计合成了1对引物,对ACCase基因的BC功能域进行扩增,所得产物与预期片段大小一致,约1.8kb.该片段与克隆载体PGEM-T Ease连接,转入感
【机 构】
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石河子大学生物工程学院,中国农业大学
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根据已知的乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)序列设计合成了1对引物,对ACCase基因的BC功能域进行扩增,所得产物与预期片段大小一致,约1.8kb.该片段与克隆载体PGEM-T Ease连接,转入感受态大肠杆菌DH5а中增殖.提取质粒进行PCR鉴定,将阳性克隆与原核表达载体PQE30分别用Kpn Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切后回收目的片段进行连接,并转入感受态大肠杆菌M15中,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确.
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