【摘 要】
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以棉花两个多标记基因系T582和T586及其后代为材料,对微卫星DNA的PCR扩增产物检测方法进行了优化研究.结果表明:检测微卫星DNA,聚丙烯酰胺银染灵敏度高于琼脂糖EB染色;聚丙烯
【机 构】
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浙江大学农学系,浙江大学农学系,宁波市农科院
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以棉花两个多标记基因系T582和T586及其后代为材料,对微卫星DNA的PCR扩增产物检测方法进行了优化研究.结果表明:检测微卫星DNA,聚丙烯酰胺银染灵敏度高于琼脂糖EB染色;聚丙烯酰胺凝胶的浓度需随着待测SSR序列的片段大小而作适当调整,一般情况下聚丙烯酰胺凝胶的浓度以6%为宜,但当待检测的DNA片段小到100bp～250bp的区域范围时,凝胶的浓度需提高到8%.胶板样品上样量以3μl为宜.在显色液预冷(约10℃)的前提下,显色的时间应控制在4min之内,以便得到的胶板DNA条带强度适中、对比度好.
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