探讨蓬子菜总黄酮(FGVL)对过氧化氢所致人脐静脉内皮细胞氧化损伤的作用及其机制。

将人脐静脉内皮细胞分为5组，包括对照组(加入1640完全培养基)、损伤组(加入100 μmol/L过氧化氢培养4 h)、FGVL 1组(12.5 mg/L FGVL培养24 h后，加入100 μmol/L过氧化氢培养4 h)、FGVL 2组(25.0 mg/L FGVL培养24 h后，加入100 μmol/L过氧化氢培养4 h)和FGVL 3组(50.0 mg/L FGVL培养24 h后，加入100 μmol/L过氧化氢培养4 h)。采用硝酸还原酶法检测细胞上清液中的一氧化氮含量，ELISA检测细胞上清液中的6-酮-前列腺素1α(6-keto-PGF1α)、血栓烷素B₂(TXB₂)、白细胞介素-6和白细胞介素-22的分泌水平，RT-PCR检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA表达水平，Western bolt检测磷酸化Akt(ser⁴⁷³)和磷酸化eNOS(ser¹¹⁷⁷)的蛋白表达水平，并观察细胞凋亡情况。

(1)损伤组细胞上清液中的一氧化氮含量为(34.11±1.78) μmol/L，低于对照组的(74.81±2.93) μmol/L(P<0.05)；FGVL 2组和FGVL 3组细胞上清液中的一氧化氮含量分别为(41.86±2.32) μmol/L和(62.79±1.16) μmol/L，均高于损伤组(P均<0.05)。(2)损伤组细胞上清液中的6-keto-PGF1α含量为(44.84±3.87) ng/L，低于对照组的(82.38±3.98) ng/L(P<0.05)；FGVL 1组、FGVL 2组和FGVL 3组细胞上清液中的6-keto-PGF1α含量分别为(52.76±1.78) ng/L、(56.58±1.44) ng/L和(67.78±2.02) ng/L，均高于损伤组(P均<0.05)。损伤组细胞上清液中的TXB₂含量为(43.37±3.96) ng/L，高于对照组的(25.56±1.75) ng/L(P<0.05)；FGVL 2组和FGVL 3组细胞上清液中的TXB₂含量分别为(32.41±1.68) ng/L和(28.23±2.15) ng/L，均低于损伤组(P均<0.05)。(3)损伤组细胞上清液中的白细胞介素-6和白细胞介素-22的含量分别为(539.74±11.63) ng/L和(43.60±2.44) ng/L，均高于对照组[白细胞介素-6含量为(288.67±19.52) ng/L，白细胞介素-22含量为(23.70±3.05) ng/L，P均<0.05]；FGVL 1组、FGVL 2组和FGVL 3组细胞上清液中的白细胞介素-6含量分别为(502.11±6.18) ng/L、(457.33±14.30) ng/L和(361.02±11.67) ng/L，均低于损伤组(P均<0.05)；FGVL 2组和FGVL 3组细胞上清液中的白细胞介素-22含量分别为(38.23±1.97) ng/L和(21.89±3.59) ng/L，均低于损伤组(P均<0.05)。(4)损伤组细胞中的PI3K和eNOS mRNA相对表达水平分别为0.68±0.09和0.22±0.03，均低于对照组(PI3K mRNA为0.81±0.12，eNOS mRNA为0.63±0.11，P均<0.05)；FGVL 2组和FGVL 3组细胞中的PI3K mRNA相对表达水平分别为0.76±0.03和0.83±0.06，均高于损伤组(P均<0.05)；FGVL 1组、FGVL 2组和FGVL 3组细胞中的eNOS mRNA相对表达水平分别为0.37±0.08、0.53±0.04和0.56±0.09，均高于损伤组(P均<0.05)。各组细胞中的Akt mRNA相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。(5)损伤组细胞中的磷酸化Akt(ser⁴⁷³)和磷酸化eNOS(ser¹¹⁷⁷)蛋白相对表达量分别为0.48±0.05和0.23±0.03，均低于对照组[磷酸化Akt(ser⁴⁷³)为0.71±0.12，磷酸化eNOS(ser¹¹⁷⁷)为0.66±0.05，P均<0.05]；FGVL 1组、FGVL 2组和FGVL 3组细胞中的磷酸化Akt(ser⁴⁷³)蛋白相对表达量分别为0.54±0.04、0.69±0.07和0.73±0.09，均高于损伤组(P均<0.05)；FGVL 1组、FGVL 2组和FGVL 3组细胞中的磷酸化eNOS(ser¹¹⁷⁷)蛋白相对表达量分别为0.53±0.05、0.71±0.10和0.65±0.07，均高于损伤组(P均<0.05)。(6)损伤组的细胞凋亡率为(63.67±11.37)%，高于对照组的(4.67±1.15)%(P<0.05)；FGVL 1组、FGVL 2组和FGVL 3组的细胞凋亡率分别为(43.33±4.16)%、(18.33±4.93)%和(15.67±2.08)%，均低于损伤组(P均<0.05)。

FGVL可减轻过氧化氢对人脐静脉内皮细胞的氧化损伤，其机制与激活PI3K/Akt/eNOS通路，从而增加一氧化氮分泌有关。