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利用纯化的可溶性人PD-1胞外域（sPD-1）蛋白为免疫原免疫小鼠，获得抗血清．免疫印迹显示该抗血清与原核表达的sPD-1有特异性反应，但与某些菌体蛋白存在交叉反应．经菌体蛋白吸附法处理后，交叉反应明显减弱．以商业化抗人PD-1抗体和小鼠sPD-1抗血清分析经亲和层析富集的活化的Jurkat T细胞表达的PD-1，只有自制的抗血清鉴定到特异反应条带，其表观分子质量为49ku．