【摘 要】
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采用重叠PCR方法扩增水貂绿脓杆菌山东分离株（PASD01株）的exoA与fliC基因,并将两段基因嵌合后,克隆到表达载体pET-30a上,转化到宿主菌BL21（DE3）中诱导表达,并对表达产物进行免疫
【机 构】
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青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室
【基金项目】
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山东省兽药诊断试剂工程技术研究中心,山东省高等学校优势学科人才团队培育计划
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采用重叠PCR方法扩增水貂绿脓杆菌山东分离株（PASD01株）的exoA与fliC基因,并将两段基因嵌合后,克隆到表达载体pET-30a上,转化到宿主菌BL21（DE3）中诱导表达,并对表达产物进行免疫原性分析.结果表明,重组嵌合蛋白在37℃,0.8mmol/LIPTG诱导7h时表达量最高;经SDS-PAGE和WesternBlot分析,该蛋白在约68kD处出现特异性条带,与预期结果一致;该重组嵌合蛋白免疫小鼠后,最高血清效价可达1∶640000.结论：水貂绿脓杆菌exoA-fliC嵌合蛋白具有良好的免疫
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