探究牛型结核分枝杆菌减毒活菌-卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin vaccine,BCG)感染人树突细胞(Dendritic cells,DCs)对新生儿脐血CD4+初始T淋巴细胞分化的作用。
方法使用BCG感染体外培养的人DCs,然后与新生儿脐血CD4+初始T淋巴细胞共培养,采用qRT-PCR检测DCs中的miRNA-99b表达水平及CD4+T淋巴细胞中的Foxp3、ROR-γt、IFN-γ及IL-10基因转录水平。利用miRNA-99b反义寡核苷酸转染DCs,与新生儿脐血CD4+初始T淋巴细胞共培养后,再次检测CD4+T淋巴细胞相关基因转录水平。采用SPSS 15.0对数据进行分析。
结果BCG感染的DCs中miRNA-99b基因转录水平明显高于未感染BCG的DCs中的转录水平(t=7.06,P<0.05)。与感染BCG的DCs共培养的CD4+T淋巴细胞中的IFN-γ基因[(45.61±4.46)比(3.54±1.73),t=32.32,P<0.01]、IL-10基因[(4.17±1.06)比(1.26±0.67),t=2.24,P<0.05]转录水平明显高于与未感染BCG的DCs共培养的CD4+T淋巴细胞,而ROR-γt基因转录水平低于与未感染BCG的DCs共培养的CD4+T淋巴细胞[(0.08±0.02)比(0.63±0.10),t=0.42,P<0.01]。与转染NC-siRNA的DCs共培养的CD4+初始T细胞相比,阻断DCs中miRNA-99b的表达后,共培养的CD4+初始T淋巴细胞Foxp3基因[(0.12±0.01)比(1.57±0.90),t=1.06,P<0.05]、IFN-γ基因[(0.03±0.01)比(0.64±0.35),t=0.44,P<0.05]、IL-10基因[(0.03±0.01)比(0.76±0.09),t=0.54,P<0.01]表达均降低,ROR-γt基因表达增加[(17.03±5.51)比(1.32±0.14),t=11.54,P<0.01]。
结论BCG通过调控DCs中miRNA-99b的表达进而诱导初始CD4+T淋巴细胞分化为Th17/Treg的失衡,导致感染的发生、发展。