【摘 要】
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通过RT-PCR技术扩增猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)coe基因,将其克隆至原核表达载体pET 32 a中,构建重组表达质粒pET 32 a-coe,鉴定正确后进行诱导
【机 构】
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河南农业大学生命科学学院,渑池县动物卫生监督所
【基金项目】
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河南省高等学校重点科研项目(30601522);河南农业大学创新基金项目(30601444)
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通过RT-PCR技术扩增猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)coe基因,将其克隆至原核表达载体pET 32 a中,构建重组表达质粒pET 32 a-coe,鉴定正确后进行诱导表达。结果表明,重组菌可表达相对分子量约为33 kD的融合蛋白;Western-Blotting结果显示,COE蛋白能与抗PEDV的阳性血清发生特异性结合反应,表明研究的COE蛋白具有良好的反应原性。纯化后的COE蛋白与弗氏佐剂按比率混合作为免疫抗原,免疫产蛋鸡,获得特异性抗猪流
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