天门冬AFLP反应体系的建立及优化

来源 :中国农学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cxzclong

【摘要】

：

为探讨天门冬种质间遗传多样性奠定基础,采用单因子试验,建立并优化了天门冬AFLP反应体系,研究酶的用量、酶切时间、预扩增体系和选择性扩增等对PCR扩增的影响。酶切反应体系

【作者】

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欧立军黄园王俞人谭智文

【机构】

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民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室,湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室,怀化学院生命科学系

【出处】

：

中国农学通报

【发表日期】

：

2011年8期

【关键词】

：

天门冬 AFLP 体系优化 Asparagus AFLP system optimization

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为探讨天门冬种质间遗传多样性奠定基础,采用单因子试验,建立并优化了天门冬AFLP反应体系,研究酶的用量、酶切时间、预扩增体系和选择性扩增等对PCR扩增的影响。酶切反应体系加入5.0U EcoR I和Mse I于37℃保温3h;连接反应体系加入1.0U T4-DNA连接酶、2.0pmol Mse I接头和2.0pmol EcoR I接头,16℃保温过夜;选择性扩增反应体系加入1.0U Taq DNA聚合酶,0.4μL EcoR I和Mse I选择性引物;并筛选得到了8对清晰、多态性高的AFLP引物。17份天

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