虹鳟IL-17多克隆抗体的制备及初步鉴定

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本研究根据NCBI已发表序列设计引物,提取经植物血凝素刺激后的虹鳟Oncorhynchusmykis。头肾细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增IL—17成熟肽基因,测序结果表明所获得的序列与发表序列相一致。将该基因重组至原核表达载体pET32a中,并转化大肠杆菌Escherichiacoli Rosetta,进行诱导表达。SDS—PAGE电泳结果表明:目的蛋白以包涵体形式表达,大小约为32kDa,重组蛋白经Ni—NTA系统纯化、复性后纯度达90%以上,以其免疫小鼠制备虹鳟IL-17多克隆抗体。ELISA
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