通用型基因打靶载体的构建及其功能鉴定

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hanjzh

【摘要】

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为了构建适合大多数基因座位点打靶的通用型基因打靶载体及打靶成功后去除正选择标记基因，以克隆载体pGEM-3Z为骨架，插入了一个正选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因（neo）、两个相

【作者】

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陈兴启孙达权刘凤军贾淑玲张涌

【机构】

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西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2008年10期

【关键词】

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转基因动物通用型基因打靶载体 LoxP序列 CRE重组酶 transgenic animals universal gene targeting vecto

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划项目（“863计划”）（No.2004AA213072）资助.

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为了构建适合大多数基因座位点打靶的通用型基因打靶载体及打靶成功后去除正选择标记基因，以克隆载体pGEM-3Z为骨架，插入了一个正选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因（neo）、两个相同的负选择标记基因单纯疱疹病毒胸苷激酶基因HSV-tk1和HSV-tk2，并在neo的两侧各添加了一个方向相同的LoxP（locus of crossing-over（x）in P1）序列及两个不同的多克隆位点序列，从而构建了载体pA2T。插入的两个不同的多克隆位点序列中，neo和HSV-tk1之间的多克隆位点序列有8个稀少的酶切

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