【摘 要】
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目的研究质粒表达型shRNA对CHL-3A4转基因细胞系细胞色素P450 3A4基因表达的抑制作用.方法设计并构建3条shRNA真核表达载体(CYP 3A4 Ⅰ、CYP 3A4Ⅱ、CYP 3A4Ⅲ),转染CHL-3A4
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目的研究质粒表达型shRNA对CHL-3A4转基因细胞系细胞色素P450 3A4基因表达的抑制作用.方法设计并构建3条shRNA真核表达载体(CYP 3A4 Ⅰ、CYP 3A4Ⅱ、CYP 3A4Ⅲ),转染CHL-3A4转基因细胞,以空载体组及无关序列的shRNA表达载体组为阴性对照;转染后48 h,Western blotting观察RNA干扰对CYP 3A4蛋白表达的影响;RNA干扰后,用HPLC法测定CHL-3A4转基因细胞的硝苯地平氧化酶的活性.结果CYP3A4Ⅲ表达载体能显著抑制CYP 3A4蛋白表达(75%),抑制硝苯地平氧化酶的活性.结论RNA干扰能抑制CYP 3A4基因表达.
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