【摘 要】
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目的:利用含绿色荧光蛋白的重组表达质粒pEG—FP—NeuroD做基因转染,观察其在肝癌细胞(HepG2)中的表达,探讨其在体外诱导肝细胞分泌胰岛素的可能性.方法:将酶切验证正确的重组质粒pE
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院内分泌科,重庆医科大学附属第一医院实验研究中心
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目的:利用含绿色荧光蛋白的重组表达质粒pEG—FP—NeuroD做基因转染,观察其在肝癌细胞(HepG2)中的表达,探讨其在体外诱导肝细胞分泌胰岛素的可能性.方法:将酶切验证正确的重组质粒pEGFP-NeuroD,用脂质体法转染3种不同葡萄糖浓度培养的HepG2细胞,荧光显微镜下观测各组绿色荧光蛋白的表达情况;采用RT-PCR方法检测HepG2细胞中NeuroD一1及insulinmRNA的表达;采用WesternBlot方法检测EGFP-NeuroD融合蛋白的表达.结果:①重组质粒体外成功转染入HepG
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