人血管抑制因子vasostatin片段在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性检测

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目的:克隆表达人vasostatin片段,纯化目的蛋白并检查活性,以研究人血管抑制因子vasostatin片段的活性区域。方法:重组构建人vasostatin片段和谷胱甘肽S转移酶(GST)融合表达质粒,转化大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达。通过GST亲和凝胶纯化目的蛋白,用凝血酶(Thrombin)酶切纯化产物获得单体va- sostatin片段,并采用MTT法检测其抑制内皮细胞增殖活性。结果:表达产物主要以包涵体形式存在,改变诱导条件可增加可溶性表达量,包涵体形式的表达量约占菌体蛋白总量
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