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利用PCR技术将pUC18和pBluescript中的多克隆位点区(MCS)及旁侧序列分别进行扩增,然后将扩增产物插入到已除去LacZα基因的pUC18中,获得三个中间载体pSUGV1,pSGV2和pSUGV3,最后将pSUPV2中无表达活性的新霉素磷酸转移酶Ⅰ(NPTⅠ)基因分别插入到三个中间载体的MCS中,构建成功大肠肝菌基因启动子探针型载体pSUPV4,pSUPV5和pSUPV6.更多还原