【摘 要】
：
RNA依赖的RNA聚合酶是EV-A71病毒进行药物设计的药物靶点蛋白之一，本研究通过已知小核糖核酸病毒科聚合酶同源结构的序列比对，设计了三个针对EV-A71 3D聚合酶，有助于提高核苷酸类似物药物结合效率的突变体，以实验室原有野生型EV-A71 3D聚合酶质粒为模板，通过PCR扩增、野生型质粒的消化分解及转化的方式，构建突变体质粒的阳性克隆，并转化入大肠杆菌3016感受态细胞，通过低温过夜诱导，超
【基金项目】
：
国家自然科学基金（项目号：82072291），题目：基于小RNA病毒2C解旋酶核心结构特征的抗病毒策略;国家自然科学基金（项目号：81772207），题目：肠道病毒解旋酶在囊泡膜上组装六聚体及催化双链RNA解旋结构基础～～；
论文部分内容阅读
RNA依赖的RNA聚合酶是EV-A71病毒进行药物设计的药物靶点蛋白之一，本研究通过已知小核糖核酸病毒科聚合酶同源结构的序列比对，设计了三个针对EV-A71 3D聚合酶，有助于提高核苷酸类似物药物结合效率的突变体，以实验室原有野生型EV-A71 3D聚合酶质粒为模板，通过PCR扩增、野生型质粒的消化分解及转化的方式，构建突变体质粒的阳性克隆，并转化入大肠杆菌3016感受态细胞，通过低温过夜诱导，超声破碎富集的菌泥，将上清经过Ni柱亲和纯化、High trap Q离子交换层析纯化及Superdex 200 10/300凝胶过滤层析三个步骤的梯度纯化，获得了高纯度高产量的EV-A71 3D聚合酶突变体重组蛋白，并通过荧光定量的方法，采用荧光定量PCR仪对最终获得的稳定表达突变体重组蛋白，进行不同溶液条件的荧光热稳定性分析，得到了该重组蛋白最佳的蛋白溶解条件。为深入研究设计以EV-A71 3D作为药物靶点进行核苷酸类似物药物设计提供了技术基础。
其他文献
新时代在高职院校学生中开展劳动教育有很多种途径，其中，在校园开展劳动教育具有独特的属性，能够为高职学生提供全面系统的劳动教育学习，高职院校应该进一步加强校园劳动教育的广度和深度，把劳动教育融入学校育人的全过程，为国家培养高素质的劳动者和技术技能人才。
习近平总书记有关劳动教育的重要论述，为新时代高职院校高素质高技术技能人才的培养注入了新内涵。劳动教育的目的是帮助学生培育积极的劳动态度、形成正确的劳动价值观、培养优良的劳动品德、掌握必备的劳动知识和技能等。高职教育着力培养高素质技术技能人才，劳动教育是涵育学生职业素养的根基和实现人才培养目标的内在需要。以课堂教学为主渠道落实、以综合测评为抓手落细、以社会实践为延伸落地是高职院校实施劳动教育的三个途
某航道新开挖段下穿高铁工程，需对下穿段基坑进行加固，减小航道基坑对邻近的高铁桥墩的扰动。基于现场工程，制定下穿段基坑抗扰动加固方案，建立有限元模型，模拟开挖全过程基坑自身及周边环境的变形情况。分析结果表明，航道基坑、周围土体及高铁桥墩对开挖的响应敏感，随着航道基坑施工不断发展变化。坚实的支护系统、分层开挖结合多次降水，可以避免较大土体沉陷，有效地控制土体开挖引发的航道及环境变形。
在新时代背景下，高职院校人才培养注重劳动教育的渗透，可以起到端正学生劳动价值取向、培养学生良好劳动思维和习惯、锻炼和提升学生劳动能力等作用。但从实际来看，高职院校劳动教育开展还存在诸多问题，特别是在人才培养方案建立、紧密联系专业教学、加强校企之间合作、开展创新创业实践等方面，严重降低了劳动教育的有效性，其重要作用也无法得到充分发挥，亟需对这些问题进行深入分析。基于此，文章采用针对性的措施进行优化改
售卖的牛乳需要热处理。牛乳受热时，功能性蛋白质往往会遭到破坏。牛乳蛋白的热稳定性是鉴定乳制品质量的关键指标。本文分析了牛乳蛋白热稳定性的研究现状，总结影响牛乳蛋白热稳定性的相关因素，通过调整这些因素和采用适当的加工工艺和条件，可以控制牛乳蛋白的热稳定性，提高乳制品的质量和生产效率。
为了快捷、大量地表达猪白细胞介素-6（IL-6）蛋白,试验采用PCR的方法,以含猪IL-6全基因的重组质粒p MD19-T-IL-6为模板扩增猪IL-6成熟蛋白基因,构建真核重组表达载体p PICZαΑ-IL-6,转化毕赤酵母野生株X-33进行分泌表达,并进行表达蛋白的初步处理和活性鉴定。结果表明:SDS-PAGE可检测到预期的蛋白条带,诱导表达24,48,72,96 h后,分泌IL-6蛋白分别占
在高等教育改革的背景下，推动教育信息化发展，已经成为高校内部一项重点工作，已经纳入各学科的教改方案。为了更好地促进教育信息化发展，很多高校开始进行长远规划，并增加相关投入，大力加强教学管理信息化建设，希望以教学管理信息化建设，支撑教育信息化发展。主要围绕四个方面的内容展开论述，依次介绍教育信息化发展的意义、问题、改进建议、长效机制，强调以教育信息化发展为目标，调整高校教学管理工作，重新确立高校教学
为满足北京大兴国际机场航站楼少柱、大空间的建筑需求，提出一种以可独立承载的大型子结构单元为基础、支承体系与屋盖结构一体化的巨型网格结构。并就结构设计中的关键问题，进行了竖向承载能力、水平抗侧能力、防连续倒塌、抗震性能研究及竖向地震作用分析，结果表明：以若干独立承载的大型子结构单元为基础构建的体系可大幅提升结构的承载能力和抗倒塌能力；两个支撑筒或支撑框架与C形柱组成三角形支承结构，承载力可提升300
基于2010—2019年221个城市的面板数据和教育消费模型，实证分析了教育信息化对居民教育消费的直接影响与中介调节作用，进一步考察了教育阶段异质性、区域差异条件下教育信息化对居民教育消费的影响。结果发现：教育信息化显著促进居民教育消费，在收入对居民教育消费的影响中发挥正向调节作用，中国其他异质性特征城市同样如此；高等教育、学前教育、小学和中学教育信息化对居民教育消费的提振作用依次减弱；东部城市教