【摘 要】
：
目的 克隆长双歧杆菌NCC2705中ATP结合蛋白BL0034的基因,利用大肠杆菌表达并纯化GST-BL0034融合蛋白,测定其结合ATP的活性.方法 以长双歧杆菌NCC2705基因组为模板PCR扩增BL00
【机 构】
：
军事医学科学院疾病预防控制所,北京,100071
论文部分内容阅读
目的 克隆长双歧杆菌NCC2705中ATP结合蛋白BL0034的基因,利用大肠杆菌表达并纯化GST-BL0034融合蛋白,测定其结合ATP的活性.方法 以长双歧杆菌NCC2705基因组为模板PCR扩增BL0034基因,双酶切后连接到pGEX-4T-1表达载体上,转入大肠杆菌BL21中表达;用谷胱甘肽-Sepharose 4B树脂对可溶性的GST-BL0034融合蛋白进行纯化,并用Western 印迹验证.结果 将BL0034基因克隆至质粒pGEX-4T-1,构建表达载体pGEX-4T-1-BL0034. BL0034经0.05 mmoL/L IPTG诱导,16℃过夜表达,SDS-PAGE可见相对分子质量约为82×103的可溶性表达条带;亲和纯化GST-BL0034,Western 印迹结果为阳性.对纯化后的融合BL0033蛋白结合ATP的能力进行了定量测定,每毫克BL0034蛋白能结合约40 nmol/L ATP.结论 成功克隆了BL0034蛋白的基因,表达并纯化GST-BL0034蛋白,证实了BL0034与ATP具有较强的结合能力,为进一步研究长双歧杆菌NCC2705 BL0034蛋白的功能奠定了基础,为阐明其在果糖ABC转运系统中如何通过水解ATP产生能量提供了前提.
其他文献
中国住房城乡建设部2014年推荐了九个项目申报“迪拜国际改善居住环境最佳范例奖”(简称“迪拜奖”),其中杭州天子岭生活垃圾处理优化管理项目进入了迪拜奖技术顾问委员会评
企业员工队伍的建设直接关系到企业的稳定与发展,随着时代的变迁,现实生活中的各种问题都发生了很多变化.新时期怎样做员工思想工作,促进单位和谐稳定?结合多年来基层工作经
对世界主要绿党纲领性文献的分析表明，可持续性/循环经济、性别平等/女性主义、非暴力、生态智慧、社会正义、参与/基层民主、国际合作、全球团结、生活质量而非数量、人权/自
基层党员长期生活在生产的第一线,是公司联系广大群众的重要桥梁。基层党员的思想工作是基层党组织的重要工作,也是党员党性先进性的体现。本文分析了党员思想工作存在的问题
第三次联合国住房和城市可持续发展会议(简称“人居三”)筹备委员会第二次会议于2015年4月14-16日在内罗毕举行,会议结束时做出了几项有关人居三会议时间和进程的重大决定.rn
在互联网时代,大数据、云计算、5G等技术的出现深刻改变着人们的学习、工作与生活方式.在这个大背景下,国有企业党建工作与新技术的融合共生已成为党务工作必经之路,国企党建
我国当前的经济情况不断的飞速发展,导致很多人在思想上也都有了全新的转变.在当前社会阶段下,一个企业政治方面的工作建设情况如何全都要依靠一个良好的政工队伍去支撑带动.
患者男 ,64岁。因阵发性头晕、心慌3个月余 ,加重 1ｄ来院就诊。体检 :神志清晰 ,痛苦表情 ,心浊音向两侧扩大 ,率慢。临床诊断 :冠心病。心电图示 :各导联Ｐ波消失 ,代之以大小
目的 探讨锁骨上入路锁骨下静脉置管胸壁放置完全植入式静脉输液港(TIVAP)的临床价值.方法 回顾性分析DSA引导下经锁骨上入路行锁骨下静脉穿刺后胸壁放置TIVAP的41例患者临床
脑部由于受到各种外力造成的不同部位的颅脑损伤,除了在脑部X片、CT、脑电地形图上表现外,对于心血管系统有何影响及心电图有何改变,我们进行了专题观测分析,结果表明:颅脑损