牛白细胞介素-17真核表达载体的构建及在牛乳腺上皮细胞中的表达

来源 :华南农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tanhuafuren
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【目的】在体外分离培养牛乳腺上皮原代细胞,并构建牛白细胞介素-17(bIL-17)基因真核表达质粒,观察重组质粒在牛乳腺上皮细胞的表达.【方法】提取牛脾脏细胞总RNA,通过RT—PCR扩增bIL-17,将6IL-17连入pMD19.T进行测序,测序成功后将6IL-17插入含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP-N3上,构建真核表达质粒pEGFP—N3-bIL-17.用脂质体法将pEGFP—N3-bIL-17质粒转染于牛乳腺上皮细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达,RT—PCR检测
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