【摘 要】
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目的对激光共聚焦显微镜在细胞内ROS研究中的激光干扰问题进行探讨。方法ROS探针标记ECV- 304及RAW264．7细胞后,激光共聚焦显微镜488nm波长检测器分别进行连续和间隔观测1200s
【机 构】
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暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学重点基金项目(30230305);国家自然科学青年基金项目(30500466)
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目的对激光共聚焦显微镜在细胞内ROS研究中的激光干扰问题进行探讨。方法ROS探针标记ECV- 304及RAW264．7细胞后,激光共聚焦显微镜488nm波长检测器分别进行连续和间隔观测1200s,比较两种观测方式下细胞荧光强度的变化;外源性加入H2O2,证实间隔观测时系统的灵敏性。结果在连续观测方式下,细胞荧光强度短时间内显著增强,改为间隔观测后细胞荧光强度变化缓慢,但维持在低水平且在外源性加入H2O2后细胞荧光强度迅速增强。结论激光共聚焦显微镜激发激光可引起细胞大量产生ROS,对检测系统造成干扰,采用间隔观测的方法可显著改善系统自身的这种缺陷,并能保持系统的检测灵敏性。
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