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摘要:【目的】建立鸟分枝杆菌感染巨噬细胞模型,探讨Toll 样受体 2(TLR2)和 Toll 样受体 6(TLR6)在鸟分枝杆菌诱导巨噬细胞凋亡中的作用,为阐明鸟分枝杆菌致病机制提供依据。【方法】用鸟分枝杆菌感染 U937 细胞,于感染 0 h、8 h、16 h、24 h 和 48 h 后分别提取细胞总蛋白,并通过 Western blot 方法检测TLR2 和 TLR6 的表达;分别提取细胞培养上清液,利用 ELISA 技术检测肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的变化情况。用鸟分枝杆菌感染阻断 TLR2 和 TLR6 后的U937 细胞,通过 Western blot 方法分别检测其促凋亡因子 BAX 和抗凋亡因子BCL-2 的表达量,用 ELISA 技术检测细胞培养上清液中 TNF-α 含量变化情况,用流式细胞仪检测 U937 细胞的凋亡变化。【结果】鸟分枝杆菌感染 U937 细胞可引起 TLR2、TLR6 和 TNF-α 表达上调;用鸟分枝杆菌感染阻断 TLR2 和 TLR6后的 U937 细胞,可使 U937 细胞内促凋亡因子 BAX 和 TNF-α 表达量下降(p<0.05),抗凋亡因子 BCL-2 表达量升高(p<0.05),并可以明显降低感染鸟分枝杆菌后的细胞的凋亡率(p<0.05)。【结论】TLR2 和 TLR6 与巨噬细胞凋亡相关,巨噬细胞通过 TLR2 和 TLR6 来识别鸟分枝杆菌,而鸟分枝杆菌反过来通过促进 TLR2 和 TLR6 的表达来影响巨噬细胞相关凋亡通路,从而诱导巨噬细胞凋亡。