【摘 要】
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利用细菌质粒M13克隆葡萄无核基因的RAPD标记UBC-269450后,采用自动荧光DNA序列分析仪对其测序.结果表明,UBC-269450由484对核苷酸及其特定序列构成.按照该序列,人工合成两个
【机 构】
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西北农林科技大学 园艺学院,Center for Viticultural Science
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利用细菌质粒M13克隆葡萄无核基因的RAPD标记UBC-269450后,采用自动荧光DNA序列分析仪对其测序.结果表明,UBC-269450由484对核苷酸及其特定序列构成.按照该序列,人工合成两个寡聚核苷酸5′CCAGT TCACT CTCAA TAGGT CC3′和5′CCAGT TCGCC CGTAA ATG3′分别作引物,当用获得该标记及其序列的亲本和无核杂种后代作模板进行PCR分析,凡是可以扩增出约590 bp片段即为无核基因携带者和表达者.进一步用其原始无核祖先无核白和商业化无核品种及C78-47×B52-122杂交组合后代做模板进行PCR扩增,凡出现约590 bp的特殊标记即为无核基因携带者和无核性状表达者.研究结果证明,18 bp寡聚核苷酸5′CCAGT TCGCC CGTAA ATG 3′具有检测葡萄无核基因的探针作用,定名为检测葡萄无核基因的探针1号(GSLP1).
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