【摘 要】
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目的研究硫氧还原蛋白5(TXNDC5)-过氧化物还原酶2(Prx2)对前列腺癌细胞耐药性的影响。方法体外培养前列腺癌PC3细胞，采用化疗药物环磷酰胺(5、10、15 μmol/L)干预24 h，另设空白对照组，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测PC3细胞中TXNDC5的表达水平。在PC3细胞中给予不同浓度环磷酰胺处理的同时沉默TXNDC5，CCK-8法检测siTXNDC5组
【机 构】
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山东第一医科大学（山东省医学科学院）生物医学科学学院（山东省医药生物技术研究中心），济南 250117,山东第一医科大学（山东省医学科学院）生物医学科学学院（山东省医药生物技术研究中心），济南 250
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目的研究硫氧还原蛋白5(TXNDC5)-过氧化物还原酶2(Prx2)对前列腺癌细胞耐药性的影响。
方法体外培养前列腺癌PC3细胞，采用化疗药物环磷酰胺(5、10、15 μmol/L)干预24 h，另设空白对照组，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测PC3细胞中TXNDC5的表达水平。在PC3细胞中给予不同浓度环磷酰胺处理的同时沉默TXNDC5，CCK-8法检测siTXNDC5组和siNC组细胞增殖活力，活性氧检测试剂盒测定活性氧自由基含量。在PC3细胞株及其环磷酰胺耐药细胞株中给予10 μmol/L环磷酰胺处理并同时沉默TXNDC5表达，检测细胞增殖活力。蛋白质印迹法检测在PC3细胞中沉默TXNDC5对Prx2蛋白表达的影响。在过表达TXNDC5的PC3细胞中沉默Prx2表达，检测Vec-Ctrl组、pcTXNDC5组、siNC组、siPrx2组、pcTXNDC5+siPrx2组的细胞增殖活力和活性氧自由基含量。
结果与空白对照组相比，环磷酰胺处理可显著提高前列腺癌PC3细胞中TXNDC5 mRNA和蛋白的表达量。10、15 μmol/L环磷酰胺处理PC3细胞12 h后，与siNC组相比，siTXNDC5组细胞增殖活力明显受抑(0.44±0.08 vs. 0.74±0.10，t＝3.647，P＝0.031；0.30±0.04 vs. 0.53±0.06，t＝6.115，P＝0.006)。10 μmol/L环磷酰胺处理PC3细胞6、12 h，与siNC组相比，siTXNDC5组细胞内活性氧自由基的生成量显著增加(2.68±0.19 vs. 1.58±0.26，t＝-6.027，P＝0.005；4.56±0.37 vs. 2.73±0.26，t＝-6.995，P＝0.003)。采用10 μmol/L环磷酰胺处理PC3及其耐药细胞株12 h，与siNC组相比，siTXNDC5组细胞增殖活力均明显受抑。蛋白质印迹法结果表明沉默TXNDC5可显著抑制Prx2的表达。沉默Prx2表达可显著抑制因TXNDC5过表达导致的细胞增殖活力升高和活性氧自由基含量降低的趋势。10 μmol/L环磷酰胺处理PC3细胞12 h，Vec-Ctrl组、pcTXNDC5组、siNC组、siPrx2组和pcTXNDC5+siPrx2组细胞增殖活力分别为0.52±0.07、0.69±0.03、0.56±0.05、0.43±0.05、0.58±0.07，差异有统计学意义(F＝8.868，P＝0.003)，pcTXNDC5+siPrx2组细胞增殖活性低于pcTXNDC5组(P＝0.045)；上述5组细胞活性氧自由基含量分别为3.26±0.46、2.09±0.49、3.16±0.38、4.62±0.26、2.87±0.36，差异有统计学意义(F＝16.037，P<0.001)，pcTXNDC5+siPrx2组活性氧自由基含量高于pcTXNDC5组(P＝0.036)。
结论TXNDC5可通过调控Prx2的表达，降低前列腺癌细胞中活性氧自由基的水平，从而增强前列腺癌细胞对化疗药物的耐药性。
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