【摘 要】
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目的构建大容量（〉10^8）的人源天然噬菌体抗体库。方法提取人外周血淋巴细胞mRNA，反转录出cDNA第一链，以此为模板，PCR扩增重链（VH）和轻链（VL）基因片段。将VL基因PCR产物插入含Loxp和Lo
【机 构】
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武汉生物制品研究所,中国药品生物制品检定所,北京生物制品研究所
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目的构建大容量（〉10^8）的人源天然噬菌体抗体库。方法提取人外周血淋巴细胞mRNA，反转录出cDNA第一链，以此为模板，PCR扩增重链（VH）和轻链（VL）基因片段。将VL基因PCR产物插入含Loxp和Loxp511序列的pDF载体中，电转化大肠杆菌XL1-Blue，构建轻链库，再将VH基因PCR产物插入轻链库载体中，电转化大肠杆菌XL1-Blue，构建初级库。进一步用初级库超感染BS1365菌，使其VH与VL发生重组，获得重组库，再利用重组库感染大肠杆菌XL1-Blue，构建工作库。结果所有VL和VL
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