猪传染性胃肠炎病毒聚合酶基因反义RNA对病毒的抑制作用

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：spcheng

【摘要】

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通过PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）聚合酶部分片段，反向插入逆转录病毒表达载体pLXSN中，用脂质体法将重组质粒plxas—pol转染PA317细胞，经抗生素G418筛选出稳定的产毒细胞克

【作者】

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于晓龙张海峰李一经

【机构】

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黑龙江省农业科学院博士后工作站,黑龙江省农业科学院畜牧研究中心,东北农业大学动物医学院

【出处】

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中国兽医科学

【发表日期】

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2006年2期

【关键词】

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猪传染性胃肠炎病毒反义RNA 逆转录病毒表达载体 transmissible gastroenteritis virus antisense RNA re

【基金项目】

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黑龙江省“十五”科技攻关计划项目（GC018510）

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通过PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）聚合酶部分片段，反向插入逆转录病毒表达载体pLXSN中，用脂质体法将重组质粒plxas—pol转染PA317细胞，经抗生素G418筛选出稳定的产毒细胞克隆，分别扩大培养后，取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3，细胞克隆产生的重组病毒效价达9．0×10^5CFU／mL。用高效价假病毒感染IBRs。细胞，再经抗生素G418筛选，提取细胞克隆总RNA，经RT-PCR证明plxas-pol整合入IBRS2细胞。以TGEV感染IBRS2细胞和具有抗性的IB

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