【摘 要】
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将纤突蛋白S的COE区域（E1）、S1D区域（E2）、C末端区域（E3）以及膜蛋白M的M3区域（E4）设计成串联表位亚单位（EC），以报道的COE和S1候选亚单位作为对照，构建了不同亚单位疫苗的杆状病毒表达体系。杆状病毒载体表达系统生产的目标蛋白，采用镍柱亲和层析进行纯化。在BALB/c小鼠上，不同亚单位疫苗的免疫原性初步评价表明，EC、COE和S1序列分别成功插入杆状病毒基因组，EC、COE和S
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
【基金项目】
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中央高校基本科研业务费专项（222201211729）；
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将纤突蛋白S的COE区域（E1）、S1D区域（E2）、C末端区域（E3）以及膜蛋白M的M3区域（E4）设计成串联表位亚单位（EC），以报道的COE和S1候选亚单位作为对照，构建了不同亚单位疫苗的杆状病毒表达体系。杆状病毒载体表达系统生产的目标蛋白，采用镍柱亲和层析进行纯化。在BALB/c小鼠上，不同亚单位疫苗的免疫原性初步评价表明，EC、COE和S1序列分别成功插入杆状病毒基因组，EC、COE和S1蛋白均能在Sf9细胞中分泌表达，但是纯化条件依蛋白而有差异。与COE和S1亚单位疫苗相比，EC亚单位疫苗能激发小鼠产生更多的特异性免疫球蛋白IgG、干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α。上述结果表明，各个亚单位疫苗均能激发小鼠的体液免疫与细胞免疫，与COE和S1亚单位疫苗相比，EC亚单位疫苗能更好的激发小鼠的体液免疫与细胞免疫。
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