P62-ASC泛素化介导自噬对NLRP3炎症小体调节的机制研究

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目的探讨棕榈酸(PA)刺激下P62介导的自噬和含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)炎症小体相互作用机制。方法分离培养小鼠Kupffer细胞(KCs),分对照组、PA组、渥曼青霉素组和雷帕霉素组。Western blot测定各组KCs中LC3、NLRP3、凋亡相关点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸酶-1(caspase-1)及Beclin-1表达水平的变化,激光共聚焦显微镜观察P62与ASC,以及P62与LC3在细胞中的共定位情况;免疫共沉淀技术测定PA刺激前后P62与ASC、LC3之间的相互作用
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