【摘 要】
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目的:通过构建血清剥夺诱导的大鼠H9C2心肌细胞模拟心肌缺血,从细胞层面探讨天麻素(gastrodin,Gas)对H9C2心肌细胞自噬(autophagy)及凋亡(apoptosis)的作用及其机制。方法:体
【机 构】
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昆明医科大学生物医学工程中心,云南省第一人民医院口腔内科,昆明医科大学基础医学院,昆明医科大学第二附属医院心内科,
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目的:通过构建血清剥夺诱导的大鼠H9C2心肌细胞模拟心肌缺血,从细胞层面探讨天麻素(gastrodin,Gas)对H9C2心肌细胞自噬(autophagy)及凋亡(apoptosis)的作用及其机制。方法:体外培养的大鼠H9C2心肌细胞随机分为对照组、血清剥夺(3~48 h)处理组、Gas(20μmol·L-1,1 h)处理组、Gas(20μmol·L-1,1 h)+3-MA(5 mmol·L-1,1 h)共同处理组和3-MA(5 mmol·L-1,1 h)处理组。采用免疫荧光双标记检测方法在荧光显微镜下观察细胞内LC3蛋白水平的变化;应用逆转录聚合酶链式反应检测Bax和Bcl-2的mRNA水平的变化;采用蛋白质印迹分析方法检测自噬相关蛋白Beclin-1,ATG5和LC3以及凋亡相关蛋白Caspase-3,Bax和Bcl-2蛋白的表达及其变化规律。结果:血清剥夺(3~48 h)诱导H9C2心肌细胞自噬水平增强;天麻素预处理可下调血清剥夺诱导的H9C2心肌细胞的自噬及凋亡水平;天麻素通过抑制H9C2心肌细胞的自噬,下调细胞的凋亡水平。结论:天麻素通过抑制血清剥夺诱导的H9C2心肌细胞自噬,从而发挥抗凋亡的心肌保护作用。
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