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目的:评估乳酸乳球菌Nisin抗性基因在德氏乳杆菌保加利亚亚种的表达活性,为建立食品级筛选标记做准备。方法将新鲜牛奶接种于含有400μg/ml乳酸链球菌素的M17平板上,在分离的菌株中筛选乳酸乳球菌,同时提取其基因组DNA和质粒DNA,根据已公布的Nisin抗性基因序列设计一对引物,以提取的基因组DNA和质粒DNA为模板进行PCR扩增,产物进行电泳分析。将目的基因插入到大肠杆菌乳杆菌穿梭质粒-pMG36e中,并在德式乳杆菌保加利亚亚种中观察目的基因的表达活性及其作为筛选标记的活性。结果成功筛选出对Nisi