【摘 要】
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通过高保真PCR克隆到含酿酒酵母甾醇C-24甲基转移酶基因编码序列及终止子序列的DNA片段ERG6，以大肠杆菌．酿酒酵母穿梭质粒YEp352为载体，磷酸甘油酸激酶基因PGK1启动子为上游调控
【机 构】
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中国科学院微生物研究所,中国科学院研究生院
【基金项目】
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国家自然科学基金(No．30470035)资助~~
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通过高保真PCR克隆到含酿酒酵母甾醇C-24甲基转移酶基因编码序列及终止子序列的DNA片段ERG6，以大肠杆菌．酿酒酵母穿梭质粒YEp352为载体，磷酸甘油酸激酶基因PGK1启动子为上游调控元件构建了酵母菌表达质粒pPERG6．通过同源重组，以铜离子螯合蛋白基因CUP1替换染色体上ERG6基因内部序列获得ERG6破坏菌株YS58．erg6，其中麦角甾醇的合成被阻断，同时细胞的生长也受到明显抑制。表达质粒pPERG6转化破坏菌株YS58-erg6后，不但使细胞恢复了合成麦角甾醇的能力，细胞生物量也得到明显提
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