稳定转染维生素D受体反义cDNA的人骨肉瘤细胞系的建立

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目的:建立稳定转染维生素D受体(VDR)反义cDNA的人骨肉瘤细胞系。方法:构建VDR反义cDNA的真核表达载体,用Lipofectamine法转染人骨肉瘤细胞系HOS-8603,经G418筛选后获得稳定转染细胞株,并用免疫组化技术检测内源性VDR蛋白的表达情况;采用瞬时转染报告基因技术从靶基因水平检测VDRas3细胞内VDR的转录激活功能。结果:筛选出6株抗G418细胞克隆(VDRas1~6),其中VDRas3细胞内源性VDR蛋白的表达量低于对照细胞。激素作用72h后,对照细胞的报告基因氯霉素乙酰转移酶
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