【摘 要】
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目的研究高效的阳离子转染NIH3T3的方法。方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,利用流式细胞仪比较三种脂质体转染效果,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例
【机 构】
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上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
【基金项目】
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上海市教委重点项目(转化02);上海教委第四期重点学科(ZDXK2001)资助项目
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目的研究高效的阳离子转染NIH3T3的方法。方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,利用流式细胞仪比较三种脂质体转染效果,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件。结果转染效率L ipo-fectAM INE2000>GenePORTs>L ipofectAM INE。在细胞融合度为60%~70%,脂质体/DNA为3μL/μg,脂质体的量为3μL,转染时间为5 h时,转染效率最高。转染结束后表达时间可以达一个月。结论L ipofectAM INE2000转染效率最佳,并优化了其最佳转染条件。
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