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为了获得高纯度的破伤风毒素，用疏水层析和离子交换层析纯化破伤风毒素。破伤风毒素培养滤液经Phenyl Sepharose疏水层析除去大部分杂质，再经DEAE Sephadex离子交换层析进一步纯化。经两步层析纯化后，毒素纯度达到2000Lf／mg PN以上，回收率为52％-73％。用此方法，连续纯化五批毒素，均获得高纯度的破伤风毒素。试验证明破伤风毒素经疏水层析和离子交换层析可得到有效纯化。