多囊卵巢综合征外周血中miR-132和SMAD4的表达对颗粒细胞增殖和凋亡的影响

来源 :天津医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jundy123
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目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)外周血中miR-132和SMAD4的表达水平及对卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法:收集2019年5月—2021年3月接受治疗的PCOS患者(PCOS组,85例),同时期来院就诊的月经规律的健康女性40名设为对照组。采用全自动生化分析仪检测黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雄烯二酮和卵泡刺激素(FSH)的水平,qRT-PCR检测miR-132、SMAD4 mRNA相对表达水平,分析以上指标在两组间的差异及PCOS组中miR-132和SMAD4的相关性。分别将siNC质粒、si-miR-132质粒、miR-NC质粒、SMAD4 mimic质粒和SMAD4 mimic+miR-132 mimic质粒转至KGN细胞中,MTT和流式细胞术分别检测转染细胞的增殖和凋亡。双荧光素酶报告实验检测miR-132和SMAD4靶向关系。结果:PCOS组LH、T、雄烯二酮和miR-132相对表达水平高于对照组,FSH和SMAD4 mRNA相对表达水平低于对照组(t=3.618、4.253、15.412、30.921、5.207、24.194,均P<0.05)。PCOS组中miR-132和SMAD4 mRNA的相对表达水平呈负相关(r=-0.876,P<0.001)。si-miR-132组中miR-132相对表达水平为0.58±0.07,低于si-NC组(2.68±0.24,t=5.201,P<0.001)。SMAD4 mimic组SMAD4 mRNA水平为1.89±0.21,高于miR-NC组(0.82±0.10)和SMAD4 mimic+miR-132 mimic组(0.63±0.08,t=3.251、4.012,P<0.05)。si-miR-132组细胞增殖率(30.5±4.1)%低于si-NC组(65.3±4.8)%(t=8.512,P<0.001),细胞凋亡率(23.7±4.2)%高于si-NC组(5.7±1.8)%(t=7.625,P<0.001)。SMAD4 mimic组细胞增殖率(25.3±4.6)%低于miR-NC组(63.3±3.6)%和SMAD4 mimic+miR-132 mimic组(63.7±5.8)%(t=3.210、3.515,P<0.05),细胞凋亡率(25.6±3.7)%,高于miR-NC组(6.3±2.0)%和SMAD4 mimic+miR-132 mimic组(6.3±1.5)%(t=9.415、10.320,P<0.001)。miR-132与SMAD4存在靶向结合位点,miR-132可靶向调节SMAD4。结论:miR-132通过靶向调节SMAD4促进颗粒细胞的增殖并抑制其凋亡,可能参与PCOS的发病。
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