【摘 要】
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目的 探讨高糖环境下白细胞介素1β(IL-1β)对视网膜Müller细胞谷氨酰胺合成酶的影响及其机制.方法 将体外培养的大鼠Müller细胞随机分为对照组(5 mmol/L葡萄糖)和实验组(2
【基金项目】
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上海市科学技术委员会科技创新登山行动计划;
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目的 探讨高糖环境下白细胞介素1β(IL-1β)对视网膜Müller细胞谷氨酰胺合成酶的影响及其机制.方法 将体外培养的大鼠Müller细胞随机分为对照组(5 mmol/L葡萄糖)和实验组(25 mmoL/L葡萄糖),分别以不同浓度的IL-1β(0、0.1、1.0、5.0、10.0 ng/ml)刺激24 h后,采用间接免疫荧光法和免疫印迹法检测两组细胞内谷氨酰胺合成酶(GS)和即早基因c-Jun的表达变化,使用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染色法测定两组细胞凋亡的情况.结果 细胞免疫荧光组化法和免疫印迹法检测显示在高糖环境下就有Müller细胞GS表达下降、IL-1β和c-Jun表达的升高(P＜0.05);IL-1β刺激24 h后,对照组和实验组Müller细胞中GS的表达都随IL-1β刺激浓度升高而逐渐降低同时c-Jun的表达随IL-1β刺激浓度的增加而升高,这一结果在高糖状态下尤为明显;流式细胞仪检测显示不同浓度的IL-1β刺激24 h后,两组细胞随着IL-1β浓度的增加凋亡率明显升高,在高糖环境下细胞凋亡率的增加更加明显.结论 模拟糖尿病状态下,免疫相关因子IL-1 β可使GS表达下降,从而影响了谷氨酸的循环,可能间接引起神经节细胞的死亡,出现早期神经视网膜功能的障碍.其可能机制为IL-1β激活了c-Jun途径而影响GS的功能.
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