【摘 要】
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目的探讨分子伴侣Rer1在hERG钾通道蛋白转运中的作用机制,并进行可能恢复hERG转运异常的药物Baf A1研究。方法将A561V突变体及野生型hERG载体瞬时转染人胚胎肾上皮细胞系(HEK293T),建立野生、突变及混合转染细胞模型;运用免疫荧光、蛋白免疫印迹检测hERG及Rer1的表达;采用小干扰RNA技术敲低Rer1表达后检测hERG蛋白的表达;V-ATP酶抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1)以1 mmol/L孵育各组细胞6 h后Western blot检测hERG蛋白表达;用膜片钳
【机 构】
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宁波市鄞州第二医院急救医学中心,中国科学院大学宁波华美医院(宁波市第二医院)普外科,宁波市医疗中心李惠利医院兴宁院区心血管内科
【基金项目】
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国家自然科学基金(81870255),浙江省自然科学基金(LY21H020001),宁波市自然科学基金(2018A610398),宁波市鄞州区科技局项目([2017]110号)。
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目的探讨分子伴侣Rer1在hERG钾通道蛋白转运中的作用机制,并进行可能恢复hERG转运异常的药物Baf A1研究。方法将A561V突变体及野生型hERG载体瞬时转染人胚胎肾上皮细胞系(HEK293T),建立野生、突变及混合转染细胞模型;运用免疫荧光、蛋白免疫印迹检测hERG及Rer1的表达;采用小干扰RNA技术敲低Rer1表达后检测hERG蛋白的表达;V-ATP酶抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1)以1 mmol/L孵育各组细胞6 h后Western blot检测hERG蛋白表达;用膜片钳
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