【摘 要】
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采用RecAb同源重组系统,将携带Ⅰ-Fb亚型CRISPR-Cas系统的鲍曼不动杆菌临床分离株AB43的csy1基因敲除,观察野生株(AB43)和缺失株(AB43△csy1)的耐药性、生物膜形成以及小鼠致
【机 构】
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扬州大学医学院/江苏省非编码RNA重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009
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采用RecAb同源重组系统,将携带Ⅰ-Fb亚型CRISPR-Cas系统的鲍曼不动杆菌临床分离株AB43的csy1基因敲除,观察野生株(AB43)和缺失株(AB43△csy1)的耐药性、生物膜形成以及小鼠致死率等生物学性状变化,并通过转录组测序分析两者间的差异表达基因.与野生株相比,csy1的缺失显著提高突变株的耐药水平和体外形成生物膜的能力,且AB43 △csy1感染组小鼠的存活率与AB43感染组相比显著降低,提示其毒力有所提高.RNA-seq分析结果显示,csy1的缺失能影响细菌与抗生素耐药性、毒力以及代谢相关基因的表达,推测是引起AB43△csy1表型变化的主要原因.结果 提示Csy1蛋白可通过调节自身基因表达抑制鲍曼不动杆菌的耐药性、生物膜形成及致病性.这说明创造有利于维持CRISPR-Cas系统的环境,保证CRISPR-Cas系统阳性菌株处于进化优势地位,使鲍曼不动杆菌保持低毒力和抗生素敏感状态.
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