【摘 要】
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目的：利用体外DNA同源重组的方法分别构建含神经生长因子（NGF）和神经生长因子受体（TrkA）基因的真核表达载体。方法：在引物5＇加上一段与载体克隆位点两端碱基序列相同的序列,PCR扩增
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30701031);江苏省高校自然科学基金资助项目(07KJB310018);江苏大学高级专业人才科研启动基金项目(09JDG072)
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目的：利用体外DNA同源重组的方法分别构建含神经生长因子（NGF）和神经生长因子受体（TrkA）基因的真核表达载体。方法：在引物5＇加上一段与载体克隆位点两端碱基序列相同的序列,PCR扩增目的基因NGF和TrkA,线性载体片段和目的基因片段经T4 DNA聚合酶的外切产生互补的单链DNA,然后37℃退火实现体外同源重组,转化并鉴定;将重组质粒转染293A细胞,免疫印迹鉴定目的基因的表达情况。结果：成功构建真核载体pcDNA3.1-NGF和pcDNA3.1-TrkA,转染细胞后的表达产物相对分子质量分别是31
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