【摘 要】
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目的 探讨肝细胞肝癌(HCC)中自然缺失突变型乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白介导的丙酮酸脱氢酶激酶2(PDK2)的差异表达情况以及可能参与调控长链非编码RNA(lncRNA)的机制.方法 将Huh7
【机 构】
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山东省立第三医院,济南250031;中国人民解放军联勤保障部队第960医院;深圳市中医院 广州中医药大学第四临床医学院
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目的 探讨肝细胞肝癌(HCC)中自然缺失突变型乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白介导的丙酮酸脱氢酶激酶2(PDK2)的差异表达情况以及可能参与调控长链非编码RNA(lncRNA)的机制.方法 将Huh7细胞随机分为空载体pcDNA3.1组和HBx-128w组,分别转染pcDNA3.1和pcDNA3.1-HBx-128w.采用Western blotting法检测HBx蛋白的表达.使用lncRNA芯片对两组稳转细胞进行检测,明确pcDNA3.1-HBx-128w转染的Huh7细胞的mRNA表达谱和lncRNA表达谱,筛选相关差异表达基因,利用RT-qPCR方法在稳转细胞中进行验证.利用生物信息学预测可能参与调控的lncRNA,并利用RT-qPCR方法在稳转细胞中进行验证.结果 PDK2在HBx-128w组Huh7细胞中呈上调表达,Fold Change为3.219.HBx-128w组Huh7细胞中PDK2的浓度比pcDNA3.1组升高(P<0.05),两组间差异倍数为3.591.HBx-128w组中的lncRNA ENST0000511361表达量较pcDNA3.1组升高(P<0.05),两组间差异倍数为3.742.结论 自然缺失突变型HBx-128w转染的Huh7细胞中,PDK2呈上调表达;LncRNA ENST0000511361可能参与HCC发展过程中PDK2表达的调控.
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