【摘 要】
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目的 从Ras同源基因家族成员A（RhoA）/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶（ROCK）通路探讨杜仲叶总黄酮促进脑出血大鼠神经功能修复的机制。方法 取SD雄性大鼠，用改良二次注血法建立脑出血模型，并按随机数字表法分为假手术组、模型组、杜仲叶总黄酮组、RhoA抑制剂组、RhoA激动剂组、杜仲叶总黄酮+RhoA激动剂组，每组20只。杜仲叶总黄酮组灌胃200 mg/kg杜仲叶总黄酮，RhoA抑制剂组腹腔注射
【基金项目】
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河北省医学科学研究课题计划项目（20190872）；
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目的 从Ras同源基因家族成员A（RhoA）/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶（ROCK）通路探讨杜仲叶总黄酮促进脑出血大鼠神经功能修复的机制。方法 取SD雄性大鼠，用改良二次注血法建立脑出血模型，并按随机数字表法分为假手术组、模型组、杜仲叶总黄酮组、RhoA抑制剂组、RhoA激动剂组、杜仲叶总黄酮+RhoA激动剂组，每组20只。杜仲叶总黄酮组灌胃200 mg/kg杜仲叶总黄酮，RhoA抑制剂组腹腔注射1 mg/kg的RhoA抑制剂Y27632,RhoA激动剂组腹腔注射30μg/kg的RhoA激动剂U-46619，杜仲叶总黄酮+RhoA激动剂组灌胃200 mg/kg杜仲叶总黄酮的同时腹腔注射30μg/kg U-46619，模型组及假手术组灌胃10 mL/kg生理盐水，1次/d，连续7 d。给药结束后，观察大鼠行为变化，采用改良神经功能缺损评分（mNSS）对神经功能缺损症状进行评估；取脑组织后称质量，计算脑组织含水量，然后制备脑组织切片并计算脑血肿体积百分比；透射电镜观察血肿周围组织神经突触结构变化；TUNEL染色法观察血肿周围组织神经元凋亡；鬼笔环肽染色观察血肿周围组织神经元骨架变化；蛋白免疫印迹法检测血肿周围组织RhoA、ROCK、细胞骨架蛋白（F-actin）、丝切蛋白（cofilin）、磷酸化cofilin（p-cofilin）、促神经元及突触生长相关蛋白[神经生长因子（NGF）、神经营养因子3（NT3）、突触后致密蛋白-95（PSD-95）、突触素（SYP）]的表达。结果 与假手术组相比，模型组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑血肿体积百分比升高，血肿周围组织神经元凋亡及骨架结构损伤，神经突触结构改变严重，RhoA/ROCK通路激活，促神经元及突触生长相关蛋白表达降低（P＜0.05）。杜仲叶总黄酮或RhoA抑制剂干预治疗均可抑制RhoA/ROCK通路激活介导的神经元骨架结构改变，提高促神经元及突触生长相关蛋白表达，缓解脑出血后血肿周围组织神经元损伤及凋亡，促进神经功能修复（P＜0.05）。RhoA激动剂可促进RhoA/ROCK通路激活，加重脑出血后神经功能损伤，并削弱杜仲叶总黄酮的促神经功能修复作用（P＜0.05）。结论 杜仲叶总黄酮可通过抑制RhoA/ROCK通路活化来改善脑出血大鼠出血症状，促进神经功能修复。
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