【摘 要】
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用电泳纯钙调素结合蛋白BP-10(CaMBP-10)免疫小鼠,制备单克隆抗体(McAb).用MEP(mercapto-ethtyl-pyridine)HyperCel疏水层析柱从细胞培养上清中纯化并获得单克隆抗体,同时测
【机 构】
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南开大学生物化学与分子生物学系,天津医科大学肿瘤学中心实验室
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用电泳纯钙调素结合蛋白BP-10(CaMBP-10)免疫小鼠,制备单克隆抗体(McAb).用MEP(mercapto-ethtyl-pyridine)HyperCel疏水层析柱从细胞培养上清中纯化并获得单克隆抗体,同时测定了抗体-抗原反应的基本特性.此单克隆抗体具有较高纯度、特异性和亲和力.亲和常数(Kaff)为1.26×109(mol/L)-1,此抗体和CaM在空间上以相同或相近的位点与CaMBP-10相结合.以胶体金标记的抗体为探针,研究CaMBP-10在豌豆幼叶、成熟叶、茎尖、茎、根等不同器官的分布特征,并与胶体金标记CaM的结合情况相对照.结果显示,CaMBP-10在植物中的分布特点与文献报道的CaM的分布特点相一致,提示CaMBP-10可能是在蛋白水平上对CaM进行区域化和可用性调节.
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