肺炎球菌调理吞噬杀菌实验方法建立与应用

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目的 建立肺炎球菌多重调理吞噬杀菌实验,并在此基础上评价肺炎球菌疫苗免疫后效果.方法 参照美国阿拉巴马大学多重调理吞噬杀菌实验方法(MOPA),构建7价肺炎球菌结合疫苗血清型的肺炎球菌的工作菌种库和HL-60细胞库,测定工作菌种库抗生素耐药性及稀释度,HL-60分化5~6d后的表面标志表达量及活性,同时测定标准血清007SP和参考血清09CS的调理杀菌值;在方法建立的基础上,对疫苗免前免后获得的6对血清样本的功能性抗体进行检测.结果 工作菌种稀释度均> 300倍;HL-60分化5~6d的表面标志表达量CD11b> 80%,CD35> 70%,CD71<15%,活细胞比例>70%,凋亡细胞比例<21%;补体的非特异杀伤均<30%.标准血清007SP和参考血清09CS的调理杀菌值稳定在质控范围内;疫苗接种后,血清样本的杀菌曲线为S型曲线,并且调理杀菌值保持在较高水平.结论 成功建立MOPA实验方法,为肺炎球菌疫苗免疫后的效果评价提供了方法依据.
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