单克隆抗体亲和层析法纯化人尿激酶

来源 :烟台大学学报(自然科学与工程版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jyc894784116
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含抗人尿激酶单克隆抗体的腹水经ProteinA-SepharoseCL4B柱纯化得到IgG纯品,分子量为150kD(重链55kD,轻链20kD),与CNBr-Sepharose4B偶联制成抗人尿激酶单克隆抗-体-Sepharose4B亲和层析介质。尿激酶粗品经单抗-Sepharose4B亲和层析柱纯化后,所得尿激酶制品比活为9×10-4~1.7×10-3mol/s·mg-1,纯化倍数为15~30倍,酶活性回收率在50%以上。 Ascites containing anti-human urokinase monoclonal antibody was purified by Protein A-Sepharose CL 4B column to obtain pure IgG with a molecular weight of 150 kD (heavy chain 55 kD, light chain 20 kD) and coupled with CNBr-Sepharose 4B to prepare anti-human urokinase monoclonal anti- Sepharose 4B affinity chromatography media. After purification of the crude urokinase by MAb-Sepharose 4B affinity chromatography, the specific activity of the urokinase product was 9 × 10-4 ~ 1.7 × 10-3mol / s · mg-1, the purification fold was 15 to 30 times , The recovery rate of enzyme activity is above 50%.
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