【摘 要】
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目的使用磁珠分选技术(MACS)对滑膜间充质干细胞(SMSC)进行分选,对比分选和未分选SMSC的成软骨能力。方法体外培养大鼠原代SMSC,用形态学观察和三系分化进行细胞鉴定。以CD105为一抗进行MACS,对筛选出的细胞进行免疫荧光和流式细胞学鉴定。用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测分选和未分选SMSC诱导后的Ⅱ型胶原(ColⅡ)、蛋白聚糖(Agg)、性别决定区Y框蛋白9(
【机 构】
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目的使用磁珠分选技术(MACS)对滑膜间充质干细胞(SMSC)进行分选,对比分选和未分选SMSC的成软骨能力。
方法体外培养大鼠原代SMSC,用形态学观察和三系分化进行细胞鉴定。以CD105为一抗进行MACS,对筛选出的细胞进行免疫荧光和流式细胞学鉴定。用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测分选和未分选SMSC诱导后的Ⅱ型胶原(ColⅡ)、蛋白聚糖(Agg)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)等成软骨指标,进行成软骨能力评价。
结果体外培养的SMSC可进行成骨、成脂、成软骨三系分化。MACS所得到的细胞免疫荧光和流式细胞学鉴定均为CD105阳性。与未分选组比较,成软骨诱导培养后CD105+SMSC阿利新蓝染色更深,并且ColⅡ(4.932±0.660比4.016±0.348;t=2.558,P=0.043),Agg(2.965±0.246比2.103±0.388;t=4.144,P=0.006),SOX9(2.836±0.316比2.143±0.347;t=2.953,P=0.026)各项成软骨指标表达均增高,差异有统计学意义。
结论磁珠分选法是一种有效分离出CD105+SMSC的方法,并且分选后的干细胞具有更强的成软骨能力。
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