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目的:探讨PUMA基因转染是否增强胰腺癌AsPC-1细胞对5-FU致凋亡的敏感性。方法:采用脂质体转染法将PUMA-pCEP4和空载体pCEP4质粒转染入胰腺癌AsPC-1细胞中,G418筛选阳性细胞。将系列浓度(0.01~100μmol/L)的5-FU分别作用于AsPC-1、AsPC-1/PUMA和AsPC-1/pCEP4细胞72h,MTT法测定各组细胞的存活率并计算IC50,FCM、断裂DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blotting检测各组细胞PUMA蛋白表达的变化。结果:AsPC-1、AsPC-1/PUMA和AsPC-1/pCEP4细胞的5-FUIC50分别为(12±1.9)、(1.6±0.4)和(10.4±1.6)μmol/L,AsPC-1/PU-MA细胞对5-FU作用的敏感性增加了7.5倍。5-FU以剂量依赖方式诱导AsPC-1细胞凋亡,但对AsPC-1/PUMA细胞所诱导的凋亡比AsPC-1和AsPC-1/pCEP4更明显。低浓度5-FU(0.1μmol/L)轻微引起AsPC-1/pCEP4[(1.14±0.28)%]和AsPC-1细胞凋亡[(0.9±0.23)%],但能诱导AsPC-1/PUMA细胞明显凋亡[(6.47±1.42)%];高浓度5-FU(1μmol/L)诱导各组细胞凋亡,但AsPC-1/PUMA细胞凋亡率[(34.54±9.36)%]明显高于AsPC-1[(12.8±3.74)%]和AsPC-1/pCEP4细胞[(15.8±5.15)%],差异均有统计学意义(P<0.01);FCM、断裂DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测显示相同的结果。PUMA蛋白在AsPC-1/PUMA细胞中的表达明显高于AsPC-1和AsPC-1/pCEP4细胞。结论:PUMA基因转染明显地增强了胰腺癌AsPC-1细胞对5-FU致凋亡作用的敏感性。