【摘 要】
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目的:建立慢病毒包装、浓缩及感染脐带血CD34+细胞的条件方法。方法:采用第3代慢病毒系统包装病毒上清,结合超滤和超速离心两种方法对病毒进行浓缩。联合应用体外扩增培养,促
【机 构】
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军事医学科学院放射与辐射医学研究所,
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目的:建立慢病毒包装、浓缩及感染脐带血CD34+细胞的条件方法。方法:采用第3代慢病毒系统包装病毒上清,结合超滤和超速离心两种方法对病毒进行浓缩。联合应用体外扩增培养,促进静止期细胞进入细胞周期、感染过程中促进细胞黏附和固定及重复感染等方法促进病毒感染。结果:CD34+细胞体外培养48h,细胞表面CD34标志物表达水平没有明显改变,通过两步法浓缩后,病毒滴度可达5.06×107/ml,对脐带血CD34+细胞的感染效率可达37.7%。结论:通过上述方法可以获得滴度为107/ml以上的慢病毒上清,实现对脐带血CD34+细胞的有效感染。
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