论文部分内容阅读
摘要[目的] 探讨中草药复方注射剂对仔猪腹泻的治疗效果。[方法] 提取中草药有效成分，制备中草药复方注射剂。用不同剂量（0.25、0.50和1.00 ml/kg）的中草药复方注射剂对人工感染的仔猪腹泻进行治疗试验。[结果] 经过3 d治疗后，3个剂量组均有明显的治疗效果，治愈率可达60%～95%，极显著高于感染对照组，剂量以0.5 ml/kg为佳。将制备的复方注射剂和临床用的硫酸庆大霉素、诺氟沙星、头孢噻呋混悬、硫酸黄连素和博落回注射剂对人工感染的仔猪腹泻进行疗效对比试验，结果表明复方注射剂的治疗效果最好，治愈率达98.0%，明显优于其他注射剂。[结论] 该中草药复方注射剂是临床上治疗仔猪腹泻的有效药物。
关键词中草药复方注射剂；治疗；仔猪腹泻
中图分类号S853.7文献标识码A文章编号0517-6611（2014）22-07435-02
中草药抗病毒的基本原理是扶正祛邪，恢复机体正常的生理状态。我国中兽药的研究与开发虽已取得一定的进展，且在一定范围内对畜禽疾病的控制取得了较好的效果，积累了丰富的临床经验，并具有一定的理论基础[1]。中草药不但可以单方使用，而且可以组成复方[2]。从目前猪病的复杂性来看，中草药在猪病防治方面，尤其是在混合感染的治疗和预防方面的优点越发突显出来[3]。笔者用0.25、0.50和1.00 ml/kg的复方注射剂对人工感染的仔猪腹泻进行治疗试验，并用制备的复方注射剂和临床用的硫酸庆大霉素、诺氟沙星、头孢噻呋混悬、硫酸黄连素和博落回注射剂对人工感染的仔猪腹泻进行疗效对比试验。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1大肠杆菌。大肠埃希菌标准血清K99均购于中国兽药监察所。
1.1.2 试验动物。试验仔猪由平凉市猪场提供。
1.1.3 试验药物。黄连、黄芩、白头翁、秦皮、四季青、铁苋菜、苦参、穿心莲等药材均购自兰州市医药超市。将购买的中草药用蒸馏水洗净风干，然后用电动粉碎机将其粉碎后备用。
1.1.4培养基。普通营养琼脂培养基，一般选用LB琼脂培养基。
1.1.5试验仪器。粉碎机、单人双面净化工作台、高压锅、真空泵、电热恒温水浴锅、电热恒温干燥箱、电热恒温培养箱。
1.2方法
1.2.1中草药有效成分的提取。采取不同的提取方法对中药有效成分进行提取。
1.2.2中草药复方注射剂的制备。依据中药提取物组方对仔猪致病性大肠杆菌的体外抑菌试验结果确定最终配方，并采用相应的方法经脱色、过滤、除菌制成复方注射剂。
1.2.3复方注射剂的质量检验。根据兽用《中药、天然药物稳定性试验技术指导原则》、《中药、天然药物局部刺激性和溶血性研究技术指导原则》、《中药、天然药物急性毒性研究的技术指导原则》和《中国兽药典》（2005版）的要求并对其进行质量检验。
1.2.4复方注射剂对仔猪腹泻的疗效试验。选择5～20日龄无病史、未免疫的仔猪100头，随机分为4组。将大肠埃希菌K99肉汤培养菌液按每头猪100亿活菌口腔灌服，进行人工接种。接种后24 h用无菌棉签在直肠内采集粪便，用大肠埃希菌标准血清K99进行凝集试验，以确认有无大肠埃希菌感染。当仔猪发生腹泻后进行治疗。第1、2、3组分别肌肉注射复方注射剂0.25、0.5和1 ml/kg，2次/d，对照组肌肉注射灭菌生理盐水，2 ml/只，2次/d，连用3 d。所有试验仔猪均在同等条件下饲养，试验期间每天观察各组猪精神、粪便、食欲及仔猪死亡情况。
1.2.5复方注射剂和其他药物的对比试验。选择5～20日龄无病史、未免疫的仔猪175头，随机分为7组，将大肠埃希菌K99肉汤培养菌液按每头猪109活菌口腔灌服，进行人工感染。当仔猪发生腹泻后，及时进行治疗。第1组肌肉注射硫酸庆大霉素；第2组肌肉注射诺氟沙星；第3组肌肉注射头孢噻呋混悬；第4组肌肉注射硫酸黄连素；第5组肌肉注射博落回；第6组肌肉注射中草药复方注射剂；第7组为对照组，肌肉注射灭菌生理盐水，2 ml/只，2次/d。连用3 d，所有试验仔猪均在同等条件下饲养，试验期间每天观察各组猪精神、粪便、食欲状况及仔猪死亡情况。
1.2.6复方注射剂的临床疗效试验。2010～2013年平凉等地区养猪场和农户散养猪3 100窝基础母猪在产子后，其中有30 121只30日龄内的仔猪出现以排黄、白色液状粪便为特征的仔猪腹泻。经临床诊断确诊为仔猪黄白痢，使用复方注射剂对发病仔猪进行治疗，治疗剂量为0.5 ml/kg，2次/d，连用3 d。
2结果与分析
2.1各药物有效成分的提取 针对各药不同的化学有效成分，分别设计了对黄连、黄芩、白头翁、秦皮、四季青、铁苋菜、苦参和穿心莲中活性成分的提取工艺，提取获得硫酸黄连素纯品、黄芩苷纯品、30∶1白头翁提取物30∶1秦皮提取物、50∶1四季青、30∶1铁苋菜提取物、20∶1苦参提取物和20∶1穿心莲提取物。
2.2中草药注射剂的制备依据中药提取物组方对仔猪致病性大肠杆菌的体外抑菌试验结果，确定以0.01 g黄连素、0.05 g黄芩苷、0.25 g白头翁、0.25 g秦皮、0.25 g四季青、0.25 g铁苋菜、0.25 g苦参和0.25 g穿心莲等为基础，采用相应的方法经脱色、过滤、除菌，添加稳定剂，配成pH为7.5～8.0的复方注射剂，作为治疗仔猪腹泻的新制剂。
2.3注射剂的质量检验经质量检验发现，制备的复方注射剂各项指标均符合要求。
2.4复方注射剂对仔猪腹泻的疗效试验人工感染24 h后采集粪便，通过凝集试验证实均存在大肠埃希菌K99。此时发现仔猪精神委顿、食欲不佳，有些仔猪开始腹泻，48 h后接种的猪全部出现腹泻。由表1可知，0.25、0.5和1.0 ml/kg的复方注射剂均对仔猪腹泻具有明显疗效，治愈率分别为60%、96%和96%，而对照组死亡率高达76%。另外，0.5和1.0 ml/kg复方注射剂的治疗效果基本一致，因此选用0.5 ml/kg作为仔猪腹泻的治疗用量。
关键词中草药复方注射剂；治疗；仔猪腹泻
中图分类号S853.7文献标识码A文章编号0517-6611（2014）22-07435-02
中草药抗病毒的基本原理是扶正祛邪，恢复机体正常的生理状态。我国中兽药的研究与开发虽已取得一定的进展，且在一定范围内对畜禽疾病的控制取得了较好的效果，积累了丰富的临床经验，并具有一定的理论基础[1]。中草药不但可以单方使用，而且可以组成复方[2]。从目前猪病的复杂性来看，中草药在猪病防治方面，尤其是在混合感染的治疗和预防方面的优点越发突显出来[3]。笔者用0.25、0.50和1.00 ml/kg的复方注射剂对人工感染的仔猪腹泻进行治疗试验，并用制备的复方注射剂和临床用的硫酸庆大霉素、诺氟沙星、头孢噻呋混悬、硫酸黄连素和博落回注射剂对人工感染的仔猪腹泻进行疗效对比试验。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1大肠杆菌。大肠埃希菌标准血清K99均购于中国兽药监察所。
1.1.2 试验动物。试验仔猪由平凉市猪场提供。
1.1.3 试验药物。黄连、黄芩、白头翁、秦皮、四季青、铁苋菜、苦参、穿心莲等药材均购自兰州市医药超市。将购买的中草药用蒸馏水洗净风干，然后用电动粉碎机将其粉碎后备用。
1.1.4培养基。普通营养琼脂培养基，一般选用LB琼脂培养基。
1.1.5试验仪器。粉碎机、单人双面净化工作台、高压锅、真空泵、电热恒温水浴锅、电热恒温干燥箱、电热恒温培养箱。
1.2方法
1.2.1中草药有效成分的提取。采取不同的提取方法对中药有效成分进行提取。
1.2.2中草药复方注射剂的制备。依据中药提取物组方对仔猪致病性大肠杆菌的体外抑菌试验结果确定最终配方，并采用相应的方法经脱色、过滤、除菌制成复方注射剂。
1.2.3复方注射剂的质量检验。根据兽用《中药、天然药物稳定性试验技术指导原则》、《中药、天然药物局部刺激性和溶血性研究技术指导原则》、《中药、天然药物急性毒性研究的技术指导原则》和《中国兽药典》（2005版）的要求并对其进行质量检验。
1.2.4复方注射剂对仔猪腹泻的疗效试验。选择5～20日龄无病史、未免疫的仔猪100头，随机分为4组。将大肠埃希菌K99肉汤培养菌液按每头猪100亿活菌口腔灌服，进行人工接种。接种后24 h用无菌棉签在直肠内采集粪便，用大肠埃希菌标准血清K99进行凝集试验，以确认有无大肠埃希菌感染。当仔猪发生腹泻后进行治疗。第1、2、3组分别肌肉注射复方注射剂0.25、0.5和1 ml/kg，2次/d，对照组肌肉注射灭菌生理盐水，2 ml/只，2次/d，连用3 d。所有试验仔猪均在同等条件下饲养，试验期间每天观察各组猪精神、粪便、食欲及仔猪死亡情况。
1.2.5复方注射剂和其他药物的对比试验。选择5～20日龄无病史、未免疫的仔猪175头，随机分为7组，将大肠埃希菌K99肉汤培养菌液按每头猪109活菌口腔灌服，进行人工感染。当仔猪发生腹泻后，及时进行治疗。第1组肌肉注射硫酸庆大霉素；第2组肌肉注射诺氟沙星；第3组肌肉注射头孢噻呋混悬；第4组肌肉注射硫酸黄连素；第5组肌肉注射博落回；第6组肌肉注射中草药复方注射剂；第7组为对照组，肌肉注射灭菌生理盐水，2 ml/只，2次/d。连用3 d，所有试验仔猪均在同等条件下饲养，试验期间每天观察各组猪精神、粪便、食欲状况及仔猪死亡情况。
1.2.6复方注射剂的临床疗效试验。2010～2013年平凉等地区养猪场和农户散养猪3 100窝基础母猪在产子后，其中有30 121只30日龄内的仔猪出现以排黄、白色液状粪便为特征的仔猪腹泻。经临床诊断确诊为仔猪黄白痢，使用复方注射剂对发病仔猪进行治疗，治疗剂量为0.5 ml/kg，2次/d，连用3 d。
2结果与分析
2.1各药物有效成分的提取 针对各药不同的化学有效成分，分别设计了对黄连、黄芩、白头翁、秦皮、四季青、铁苋菜、苦参和穿心莲中活性成分的提取工艺，提取获得硫酸黄连素纯品、黄芩苷纯品、30∶1白头翁提取物30∶1秦皮提取物、50∶1四季青、30∶1铁苋菜提取物、20∶1苦参提取物和20∶1穿心莲提取物。
2.2中草药注射剂的制备依据中药提取物组方对仔猪致病性大肠杆菌的体外抑菌试验结果，确定以0.01 g黄连素、0.05 g黄芩苷、0.25 g白头翁、0.25 g秦皮、0.25 g四季青、0.25 g铁苋菜、0.25 g苦参和0.25 g穿心莲等为基础，采用相应的方法经脱色、过滤、除菌，添加稳定剂，配成pH为7.5～8.0的复方注射剂，作为治疗仔猪腹泻的新制剂。
2.3注射剂的质量检验经质量检验发现，制备的复方注射剂各项指标均符合要求。
2.4复方注射剂对仔猪腹泻的疗效试验人工感染24 h后采集粪便，通过凝集试验证实均存在大肠埃希菌K99。此时发现仔猪精神委顿、食欲不佳，有些仔猪开始腹泻，48 h后接种的猪全部出现腹泻。由表1可知，0.25、0.5和1.0 ml/kg的复方注射剂均对仔猪腹泻具有明显疗效，治愈率分别为60%、96%和96%，而对照组死亡率高达76%。另外，0.5和1.0 ml/kg复方注射剂的治疗效果基本一致，因此选用0.5 ml/kg作为仔猪腹泻的治疗用量。