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目的：了解我院临床分离革兰氏阴性杆菌的分布特点及耐药情况，为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法：收集我院2012年6月至2014年6月临床送检的各类标本中分离885例革兰氏阴性杆菌，进行分析、整理，并对其耐药性进行分析。结果：革兰氏阴性杆菌检出率为63.7%，885例革兰氏阴性杆菌主要菌群分布依次是铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、不动杆菌属、肺炎克雷伯菌、肠杆菌属。常用抗生素中耐药率超过50%的有氨苄西林、复方新诺明和头孢呋辛；亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦及头孢吡肟，对革兰氏阴性各属细菌的敏感率都处于较高的水平。结论：医院感染以革兰氏阴性杆菌为主，临床应根据细菌耐药表型检测和药敏结果合理选用抗菌药物。应加强对产酶菌和多重耐药菌的检测，为临床正确使用抗菌药物提供实验依据。