探索转化生长因子β1（TGF-β1）体外诱导肾脏成纤维细胞活化过程中自噬的变化情况。
方法（1）10 μg/L TGF-β1刺激大鼠肾脏成纤维细胞（NRK-49F）不同时间（0、12、24 h），倒置显微镜观察细胞形态变化，Western印迹检测细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原（ColⅠ）表达情况。（2）不同浓度TGF-β1（0、2、5、10、15、20 μg/L）刺激细胞1 h，10 μg/L TGF-β1刺激细胞不同时间（0 min、7 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h），Western印迹检测自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）、p62及自噬相关蛋白总哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（t-mTor）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTor）、Beclin 1表达情况。（3）血清饥饿处理细胞2.5 h后，加入10 μg/L TGF-β1刺激细胞不同时间（0、1、4 h），倒置显微镜观察细胞形态变化，Western印迹检测LC3、p62表达水平。
结果（1）TGF-β1刺激NRK-49F细胞后，细胞形态逐渐由星状转变为长梭形；随着刺激时间的延长，细胞活化标志物α-SMA、ColⅠ表达水平也逐渐增加（均P<0.05）。（2）TGF-β1增加NRK-49F细胞中p62蛋白表达（4 h左右达峰值），同时测得细胞中p-mTor一过性增加（约30 min时达峰值）、Beclin1表达量逐渐降低（均P<0.05）。（3）TGF-β1降低了血清饥饿处理后的NRK-49F细胞中LC3-Ⅱ的表达，同时促使细胞p62蛋白表达升高（均P<0.05）。
结论在TGF-β1体外诱导肾脏成纤维细胞活化过程中，细胞自噬活性受到抑制，进而可能促进肾间质纤维化的发生和发展。